Characterizing BCL-2 family protein domains in membranes:insertion, interaction and apoptotic modulation roles

El objetivo de mi tesis doctoral es el estudio de los dominios transmembrana (TMD) de las proteínas de la familia Bcl-2. La principal función de esta familia de proteínas es la regulación del proceso apoptótico (1,2). Para Ello, se establece un balance de interacciones proteína-proteína entre los miembros pro- y antiapoptóticos de esta familia proteica (3,4). Nuestra hipótesis de trabajo postula que los fragmentos transmembrana de dichas proteínas pueden estar implicados no sólo en su localización subcelular sino también en el establecimiento de la red de interacciones entre proteínas Bcl-2 así como en el desarrollo de su función apoptótica.. Para corroborar esta hipótesis, hemos analizado la capacidad de interacción de los dominios transmembrana, de todos los miembros pro- y antiapoptóticos de la familia de proteínas Bcl-2 mediante el sistema ToxR en bacterias, trasladando posteriormente los resultados a un sistema eucariótico por medio de ensayos de complementación de fluorescencia (BiFC). En primer lugar analizamos la capacidad de estos TMDs para homooligomerizar, utilizando tanto el sistema ToxR como BiFC, obteniendo resultados positivos en todos los transmembrana estudiados a excepción de Bid. Los ensayos de complementación de fluorescencia en células tumorales eucariotas permitieron además demostrar la localización mitocondrial de estas interacciones por ensayos de colocalización y fraccionamiento subcelular. El siguiente objetivo fue establecer el patrón de interacciones de cada uno de los TMD con el resto de proteínas de la familia Bcl-2 empleando de nuevo estos sistemas. El análisis de los resultados de ambos estudios nos ha permitido elaborar el primer mapa de interacciones producidas exclusivamente por los dominios transmembrana de las proteínas de la familia Bcl-2 (5). Uno de los puntos clave durante la realización de la tesis doctoral ha sido la búsqueda de aplicaciones clínicas para los TMDs en el campo de los tratamientos antitumorales. Por ello, realizamos la síntesis química de los fragmentos transmembrana de las proteínas antiapoptóticas Bcl-2, Bcl-xL, Bcl-w y Mcl-1 así como de las efectoras Bax y Bak. Utilizando la interferometría dual polarizada determinamos que los TMDs se asocian e insertan preferentemente en liposomas con una composición de tipo mitocondrial; demostramos además que esta asociación/inserción no afectaba a la membrana mitocondrial interna mediante ensayos de swelling mitocondrial. El siguiente objetivo fue determinar su capacidad para desestabilizar la membrana mitocondrial externa y producir la muerte celular. Específicamente alguno de los péptidos TMD, en mayor grado Bak y Bcl-xL pero también Bcl-2 y Bax, fueron capaces de desestabilizar liposomas con una composición mitocondrial, liberando su contenido de calceína el exterior. El “mitochondrial priming” se basa en sensibilizar a la mitocondria de la célula tumoral para que dicha célula sea más susceptible de responder a distintos tratamientos. Basándonos en esta idea, decidimos utilizar como segunda aproximación concentraciones subletales de éstos péptidos en combinación con el compuesto antitumoral cis-platino (CDDP) para determinar si estos péptidos transmembrana eran capaces de sensibilizar a la mitocondria. Los resultados mostraron que tanto Bcl-xL como Bak (y en un grado más moderado Bcl-2 y Bax) en concentraciones subletales fueron capaces de incrementar la sensibilidad de las líneas tumorales HeLa y HCT-116 frente al estímulo apoptótico de CDDP (6). Los resultados de este estudio abren la posibilidad del uso de estos péptidos transmembrana como herramienta farmacológica capaz de desestabilizar la mitocondria y sensibilizar a las células tumorales frente a estímulos apoptóticos.Apoptosis (programmed cell death) is executed by strongly regulated pathways to remove infected, damaged or ectopic cells. However, Apoptosis dysregulation is at the root of a variety of diseases. The BCL-2 family of proteins are involved in sensing various cellular stress linked to mitochondrial outer membrane permeabilization (MOMP). Upon the induction of apoptosis, the integrity of the MOM is breached, resulting in the release of cytochrome c and other proteins into the cytoplasm. A series of protein-protein and protein-membrane interactions are thus activated and controlled in the membranes. Up to now, several studies reveal that these interactions are lead by the commonly shared BH3 domain (BCL-2 Homology domain) but characterizing their membrane interaction properties will further our understanding on the mechanistic role of the BCL-2 family of proteins in the MOMP and the complexity of regulating apoptosis. The putative TM domains of anti- apoptotic (Bcl-2, Bcl-xL, Bcl-w and Mcl-1), pro-apoptotic (Bax, Bak) and BH3-only members have been characterized for their structure and interaction properties in a membrane context. The roles of these C-terminal putative TM domains in MOMP and apoptosis were further investigated on liposomes, isolated mitochondrial and whole cell. Overall the results demonstrate the capability of BCL-2 TMDs to establish an interaction network in the MOM. Furthermore, some of these BCL-2 TMDs can destabilize the MOM integrity, promoting cytochrome c release and apoptosis

The politicisation of journalism in Spain: three obstacles to the professional autonomy of journalists

Political journalism plays a key role in current democracies. However, its functional features and dynamics change depending on the geographic context within which they are set. One of the distinctive features of the Spanish case is the high level of political commitment on the part of the media. The aim of this paper is to analyse the main problems that currently result from this high level of politicisation and, consequently, the obstacles it produces for the proper functioning of democracy. Thus, this issue is analysed in depth in terms of three fundamental aspects: soundbite journalism, the influence of press offices, and the television coverage of electoral campaigns based on the proportion of parliamentary representation. The methodology is based on in-depth interviews conducted with a sample of 45 individuals (22 journalists, 16 political actors, and 7 spin doctors). The results show that the three obstacles defined are factors that boost politicisation. They limit journalism’s traditional functions of observing and supervising politics and pave the way for political actors to control the media through interference in their productive routines. Similarly, significant differences are detected when assessing these interferences depending on the actors involved. Journalists assess these interferences negatively due to their involvement in reducing their professional autonomy. However, they recognise their inability to provide a joint response to these obstacles. Politicians deploy a double discourse. They lament how widespread these practices are but also justify their existence as a lesser evil or deflect responsibility towards journalists, whom they blame for their current presence.El periodismo político desempeña un papel clave en las democracias actuales. No obstante, sus características y dinámicas de funcionamiento cambian en función del contexto geográfico en el que se insertan. En el caso español, uno de sus rasgos distintivos es el alto nivel de compromiso político de los medios. El objetivo de este artículo es analizar los principales problemas que se derivan actualmente de ese elevado grado de politización y, en consecuencia, los obstáculos que se presentan para el correcto funcionamiento de la democracia. Para ello, se profundiza en esta cuestión a partir de tres aspectos fundamentales: el periodismo declarativo, la influencia de los gabinetes de comunicación y la cobertura televisiva en campaña electoral basada en la proporcionalidad parlamentaria. La metodología se basa en la aplicación de entrevistas en profundidad a una muestra de 45 sujetos (22 periodistas, 16 actores políticos y 7 consultores políticos). Los resultados demuestran que los tres obstáculos definidos actúan como factor potenciador de la politización, ya que limitan las funciones tradicionales de observación y supervisión de la política operadas por el periodismo y abren las puertas al control de los medios por parte de los actores políticos mediante la interferencia en las rutinas productivas. Igualmente, se detectan diferencias significativas a la hora de valorar estas obstrucciones entre los actores implicados. Los periodistas las valoran negativamente por sus implicaciones en la reducción de su autonomía profesional, pero reconocen su incapacidad para dar una respuesta conjunta a las mismas. Por su parte, los políticos despliegan un doble discurso, lamentando la generalización de estas prácticas pero justificando también su existencia como un mal menor o desviando la responsabilidad hacia los periodistas, a quiénes se culpa de su vigencia

Predictive potential of SARS-CoV-2 RNA concentration in wastewater to assess the dynamics of COVID-19 clinical outcomes and infections

Coronavirus disease 2019 -caused by the severe acute respiratory syndrome coronavirus 2 (SARS-CoV-2)-, has trig-gered a worldwide pandemic resulting in 665 million infections and over 6.5 million deaths as of December 15, 2022. The development of different epidemiological tools have helped predict new outbreaks and assess the behavior of clinical variables in different health contexts. In this study, we aimed to monitor concentrations of SARS-CoV-2 in wastewater as a tool to predict the progression of clinical variables during Waves 3, 5, and 6 of the pandemic in the Spanish city of Xativa from September 2020 to March 2022. We estimated SARS-CoV-2 RNA concentrations in 195 wastewater samples using the RT-PCR Diagnostic Panel vali-dated by the Center for Disease Control and Prevention. We also compared the trends of several clinical variables (14-day cumulative incidence, positive cases, hospital cases and stays, critical cases and stays, primary care visits, and deaths) for each study wave against wastewater SARS-CoV-2 RNA concentrations using Pearson's product-moment correlations, a two-sided Mann-Whitney U test, and a cross-correlation analysis. We found strong correlations between SARS-CoV-2 concentrations with 14-day cumulative incidence and positive cases over time. Wastewater RNA concentrations showed strong correlations with these variables one and two weeks in advance. There were significant correlations with hospitalizations and critical care during Wave 3 and Wave 6; cross-correlations were stronger for hospitalization stays one week before during Wave 6. No association between vaccination percentages and wastewater viral concentrations was observed. Our findings support wastewater SARS-CoV-2 concentrations as a potential surveillance tool to anticipate infection and epidemiological data such as 14-day cumulative incidence, hospitalizations, and critical care stays. Public health authorities could use this epidemiological tool on a similar population as an aid for health care decision-making during an epidemic outbreakThis research was funded by the Valencian International University and Generalitat Valenciana (GVA) through the Grants to emerging research groups 2023 (CE2023) from the Regional Ministry of Innovation, Universities, Science and Digital Society (CIGE/2022/58).Medicin

Murine models for the study of fetal alcohol spectrum disorders: An overview

Prenatal alcohol exposure is associated to different physical, behavioral, cognitive, and neurological impairments collectively known as fetal alcohol spectrum disorder. The underlying mechanisms of ethanol toxicity are not completely understood. Experimental studies during human pregnancy to identify new diagnostic biomarkers are difficult to carry out beyond genetic or epigenetic analyses in biological matrices. Therefore, animal models are a useful tool to study the teratogenic effects of alcohol on the central nervous system and analyze the benefits of promising therapies. Animal models of alcohol spectrum disorder allow the analysis of key variables such as amount, timing and frequency of ethanol consumption to describe the harmful effects of prenatal alcohol exposure. In this review, we aim to synthetize neurodevelopmental disabilities in rodent fetal alcohol spectrum disorder phenotypes, considering facial dysmorphology and fetal growth restriction. We examine the different neurodevelopmental stages based on the most consistently implicated epigenetic mechanisms, cell types and molecular pathways, and assess the advantages and disadvantages of murine models in the study of fetal alcohol spectrum disorder, the different routes of alcohol administration, and alcohol consumption patterns applied to rodents. Finally, we analyze a wide range of phenotypic features to identify fetal alcohol spectrum disorder phenotypes in murine models, exploring facial dysmorphology, neurodevelopmental deficits, and growth restriction, as well as the methodologies used to evaluate behavioral and anatomical alterations produced by prenatal alcohol exposure in rodents.This work was supported by Red de Salud Materno-Infantil y del Desarrollo (SAMID) (RD12/0026/0003 and RD16/0022/0002) from Instituto de Salud Carlos III and the PI15/01179 grant from Instituto de Salud Carlos II

Análisis del proceso de elaboración y tutorización de los TFG y TFM

Esta comunicación refleja el trabajo realizado por una red docente para, por una parte, elaborar una ficha de seguimiento que facilite la acción de guía, apoyo y asesoramiento del tutor con cada uno de sus alumnos tutorizados en los trabajos de fin de grado y trabajos de fin de máster (TFG/TFM). Por otra parte, también se ha pretendido conocer la opinión y grado de satisfacción del alumnado sobre el proceso de desarrollo del TFG/TFM, la labor del centro y el programa formativo, la función del tutor asignado, y la satisfacción general con el trabajo. Para ello se ha elaborado una ficha de seguimiento y se ha pasado una encuesta on-line a los alumnos de seis titulaciones que han desarrollado el trabajo en las convocatorias C3 y C4 del curso académico 2013-2014. Con ello se pretende iniciar un proceso de seguimiento y mejora de este nuevo instrumento formativo y evaluativo del alumno, el TFG/TFM, con el que tanto docentes como alumnos van a tener que trabajar en los próximos años

El proceso de elaboración y tutorización de los TFG y TFM a examen

Dentro del trabajo de coordinación y tutorización de los trabajos fin de grado y trabajos fin de master (TFG/TFM), esta memoria refleja el trabajo realizado por una red docente para: a) elaborar una ficha de seguimiento que facilite la acción de guía, apoyo y asesoramiento del tutor con cada uno de sus alumnos tutorizados y b) conocer la opinión y grado de satisfacción del alumnado sobre el proceso de desarrollo del TFG/TFM, la labor del centro y el programa formativo, la función del tutor asignado, y la satisfacción general con el trabajo. Para ello se ha elaborado una ficha de seguimiento y se ha pasado una encuesta on-line a los alumnos de las titulaciones de ADE, Economía, Turismo, Relaciones Laborales y Recursos Humanos y GAP que han desarrollado el trabajo en las convocatorias C3 y C4 del curso académico 2013-2014. Con ello se pretende iniciar un proceso de seguimiento y mejora de este nuevo instrumento formativo y evaluativo del alumno, el TFG/TFM, con el que tanto docentes como alumnos vamos a tener que trabajar en los próximos años. De este modo, esta memoria refleja el inicio de una investigación encaminada a una mejor comprensión y análisis de este instrumento evaluativo

Models for the Study of Fetal Alcohol Spectrum Disorders: An Overview

Prenatal alcohol exposure is associated to different physical, behavioral, cognitive, and neurological impairments collectively known as fetal alcohol spectrum disorder. The underlying mechanisms of ethanol toxicity are not completely understood. Experimental studies during human pregnancy to identify new diagnostic biomarkers are difficult to carry out beyond genetic or epigenetic analyses in biological matrices. Therefore, animal models are a useful tool to study the teratogenic effects of alcohol on the central nervous system and analyze the benefits of promising therapies. Animal models of alcohol spectrum disorder allow the analysis of key variables such as amount, timing and frequency of ethanol consumption to describe the harmful effects of prenatal alcohol exposure. In this review, we aim to synthetize neurodevelopmental disabilities in rodent fetal alcohol spectrum disorder phenotypes, considering facial dysmorphology and fetal growth restriction. We examine the different neurodevelopmental stages based on the most consistently implicated epigenetic mechanisms, cell types and molecular pathways, and assess the advantages and disadvantages of murine models in the study of fetal alcohol spectrum disorder, the different routes of alcohol administration, and alcohol consumption patterns applied to rodents. Finally, we analyze a wide range of phenotypic features to identify fetal alcohol spectrum disorder phenotypes in murine models, exploring facial dysmorphology, neurodevelopmental deficits, and growth restriction, as well as the methodologies used to evaluate behavioral and anatomical alterations produced by prenatal alcohol exposure in rodents

Murine Models for the Study of Fetal Alcohol Spectrum Disorders: An Overview.

Prenatal alcohol exposure is associated to different physical, behavioral, cognitive, and neurological impairments collectively known as fetal alcohol spectrum disorder. The underlying mechanisms of ethanol toxicity are not completely understood. Experimental studies during human pregnancy to identify new diagnostic biomarkers are difficult to carry out beyond genetic or epigenetic analyses in biological matrices. Therefore, animal models are a useful tool to study the teratogenic effects of alcohol on the central nervous system and analyze the benefits of promising therapies. Animal models of alcohol spectrum disorder allow the analysis of key variables such as amount, timing and frequency of ethanol consumption to describe the harmful effects of prenatal alcohol exposure. In this review, we aim to synthetize neurodevelopmental disabilities in rodent fetal alcohol spectrum disorder phenotypes, considering facial dysmorphology and fetal growth restriction. We examine the different neurodevelopmental stages based on the most consistently implicated epigenetic mechanisms, cell types and molecular pathways, and assess the advantages and disadvantages of murine models in the study of fetal alcohol spectrum disorder, the different routes of alcohol administration, and alcohol consumption patterns applied to rodents. Finally, we analyze a wide range of phenotypic features to identify fetal alcohol spectrum disorder phenotypes in murine models, exploring facial dysmorphology, neurodevelopmental deficits, and growth restriction, as well as the methodologies used to evaluate behavioral and anatomical alterations produced by prenatal alcohol exposure in rodents

Implantación de la evaluación continua en los títulos de grado

Esta comunicación refleja el trabajo realizado por una red docente para elaborar las guías docentes de cuatro asignaturas nuevas de grado y conocer la opinión del alumnado sobre la implantación de la evaluación continua propia de los títulos de grado. Se muestra, por una parte, el proceso colaborativo para la elaboración de cuatro guías docentes del departamento de Organización de Empresas que se han implantado en el curso académico 2013-14, junto con la elaboración de material docente para dichas asignaturas. A su vez, se analiza la encuesta realizada al alumnado en una asignatura para conocer su opinión sobre el proceso de evaluación continua que estamos estableciendo en las nuevas asignaturas de grado. Esta opinión nos ha servido para ajustar mejor los procesos de evaluación

The Effects of Vegetarian and Vegan Diet during Pregnancy on the Health of Mothers and Offspring

Vegetarian and vegan diets have increased worldwide in the last decades, according to the knowledge that they might prevent coronary heart disease, cancer, and type 2 diabetes. Althought plant-based diets are at risk of nutritional deficiencies such as proteins, iron, vitamin D, calcium, iodine, omega-3, and vitamin B12, the available evidence shows that well planned vegetarian and vegan diets may be considered safe during pregnancy and lactation, but they require a strong awareness for a balanced intake of key nutrients. A review of the scientific literature in this field was performed, focusing specifically on observational studies in humans, in order to investigate protective effects elicited by maternal diets enriched in plant-derived foods and possible unfavorable outcomes related to micronutrients deficiencies and their impact on fetal development. A design of pregestational nutrition intervention is required in order to avoid maternal undernutrition and consequent impaired fetal growth